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단백질 프로토콜

안태호 저자(글)
전남대학교출판부 · 2012년 08월 30일
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생명과학 전공자를 위한 단백질 연구 방법『단백질 프로토콜』. 이 책은 생물학, 생화학, 기초의학 및 기타 생명과학 전공자들에게 단백질 연구방법을 위한 프로토콜을 제공하는 책이다. 이 책은 단백질 연구에 기본이 될 수 있는 다양한 방법들을 그대로 재현할 수 있도록 자세히 설명했다. 각 장의 구성은 원리, 재료 및 기자재, 실험방법, 주의사항, 참고문헌 등의 순서이며 이해를 돕기 위해 실험 scheme, 흐름도, 배경지식, 분자구조 등을 그림으로 수록했다.

작가정보

저자(글) 안태호

목차

  • 제1장 단백질 농축(침전) 방법 17
    A. Trichloroacetic acid (TCA)를 이용한 침전법 18
    B. TCA­Deoxycholate (DOC)를 이용한 침전법 20
    C. 유기용매를 이용한 침전법 22
    D. Polyethylene glycol (PEG) 침전법 24
    E. Ammonium sulfate에 의한 침전법 26
    F. 면역침전법 29

    제2장 단백질 농도 정량 33
    A. Bichinchoninic acid (BCA) Assay 34
    B. Bradford 방법 (Micro­assay) 38
    C. Lowry Assay (1) 42
    D. Lowry Assay (2) 44
    E. Fluorescamine을 이용한 단백질 정량법 46
    F. Fluorescamine을 이용한 펩타이드 농도 정량 48
    G. NanoOrange를 이용한 단백질 농도 정량 50
    H. o­Phthaldialdehyde (OPA)를 이용한 단백질/펩타이드 농도 정량 53
    I. 단백질의 아미노산 구성 성분(amino acid composition)을 이용한 정량법 55
    J. 280 nm에서의 흡광도(A280)를 이용한 단백질 정량법 58
    K. 205 nm에서의 흡광도(A205)를 이용한 단백질 정량법 60
    L. 단백질 내 Tryptophan 농도(개수) 구하기 62

    제3장 단백질 염색법 65
    A. Coomassie Brilliant Blue (CBB) R을 이용한 염색법 66
    B. 은 염색법 (1) 68
    C. 은 염색법 (2) 71
    D. SYPRO (Ruby, Red) 염색법 73
    E. Copper chloride (CuCl2) 염색법 75
    F. Imidazole과 Zn2+을 이용한 염색법 77
    G. Potassium acetate/chloride 염색법 79
    H. Coomassie Brilliant Blue G­250 염색법 81
    I. Colloidal CBB G­250을 이용한 염색법 83
    J. Periodic acid­Schiff (PAS) 염색법 85
    K. Ponceau S 염색법 89
    L. Amido black 염색법 92
    M. 면역분석을 이용한 당단백질 검출 94
    N. Lectin을 이용한 당단백질 검출 99
    O. Blot membrane 상에서 인산화 단백질의 염색 102

    제4장 Gel, blot membrane으로부터 단백질 회수 105
    A. 단순확산을 통한 gel로부터 단백질 회수 (1) 106
    B. 단순확산을 통한 gel로부터 단백질 회수 (2) 108
    C. 전기를 이용한 단백질 회수 109
    D. Blot membrane으로부터 단백질 회수 112

    제5장 혈청, 혈장, 복수액 등으로부터 항체 정제법 115
    A. Protein A/G를 이용한 IgG 정제 116
    B. Thiophilic 크로마토그래피를 이용한 IgG 정제 119
    C. 염류(salt)를 이용한 IgG 정제 122
    D. Caprylic acid 이용한 IgG 정제 124
    E. 항원이 고정화된 레진을 이용한 IgG 정제 126

    제6장 항체의 접합체 만들기 129
    A. Glutaraldehyde 가교제를 이용한 alkaline phosphatase와 항체의 결합 131
    B. Maleimide를 이용한 alkaline phosphatase와 항체의 결합 135
    C. b­Galactosidase와 항체의 결합 139
    ­ Ellman’s assay 141
    D. Horseradish peroxidase와 항체의 결합 143
    ­ Periodate에 의한 HRP 활성화 144
    E. 항체의 digoxigenin 표지 146
    F. 항체에 형광염료 표지 148
    G. 항체에 biotin 표지 152
    ­ HABA assay 155

    제7장 항체, 단백질, 펩타이드의 고정화 159
    A. Protein A 레진을 이용한 항체의 고정화 160
    B. Protein A 레진을 이용한 항체의 고정화 163
    C. SulfoLink gel을 이용한 단백질 고정화 165
    D. AminoLink gel을 이용한 단백질 고정화 169
    E. Affi­Gel을 이용한 폴리펩타이드의 고정화 171
    F. Cyanogen bromide 가교제에 의한 폴리펩타이드의 고정화 175
    G. 기타 고정화 방법 178

    제8장 펩타이드와 캐리어 단백질의 결합 181
    A. Glutaraldehyde 가교제를 이용한 결합 183
    B. EDC를 이용한 결합 방법 185
    C. Sulfo­SMCC를 이용한 결합 방법 187

    제9장 단백질 정제 191
    A. 소규모의 재조합 단백질 발현 및 용해도 테스트 192
    B. GST­융합 단백질의 정제 195
    C. GST­융합 단백질로부터 GST 제거 1; PreScission protease 사용 198
    D. GST­융합 단백질로부터 GST 제거 2; thrombin 또는 Factor Xa 사용 201
    E. 혈액 시료로부터 albumin 제거 혹은 정제 205
    ­ ATPase 활성 측정 206
    F. His­tag단백질 정제 209
    G. NADP+­dependent dehydrogenase 또는 NADP+에 친화력을 갖는 단백질의 정제 213
    H. 당단백질 정제 215
    I. Calmodulin 결합 단백질, ATPases, adenylate cyclases, protein kinases, phosphodiesterases 단백질의 정제 217
    J. Serine proteases의 제거 혹은 정제 219
    K. 대장균 내에서 발현된 MBP (maltose binding protein)­ 융합 단백질의 정제 221

    제10장 단백질의 화학적 변형 225
    A. Cysteine 잔기의 carboxymethylation (1) 226
    B. Cysteine 잔기의 carboxymethylation (2) 228
    C. 단백질의 succinylation 229
    D. 단백질 N­말단의 카복실화 231
    E. 타이로신의 nitration 233

    제11장 단백질의 화학적 분해 237
    A. CNBr에 의한 Methionyl­X 펩타이드 결합의 분해 238
    B. CNBr에 의한 Tryptophanyl­X 펩타이드 결합의 분해 241
    C. NTCB에 의한 Cysteinyl­X 펩타이드 결합의 분해 243
    D. Hydroxylamine에 의한 Asparaginyl­Glycyl 펩타이드 결합의 분해 245

    제12장 단백질­단백질 상호작용 249
    A. GST­융합 단백질을 32P로 표지 250
    B. Far­Western Blotting 253
    C. GST pull­down 분석 256
    D. Co­immunoprecipitation 259
    E. 단백질 태그(tag)를 이용한 pull­down 분석 263

    제13장 Protease Footprinting 267
    A. Protein kinase A를 이용한 단백질의 말단 부위 표지 269
    B. Fe­EDTA 라디칼에 의한 protease footprinting 반응 271
    C. 단백질 가수분해 효소에 의한 protease footprinting 274
    질량분석을 위한 단백질의 제한적 분해 276
    A. 용액에 용해되어 있는 단백질의 제한적 분해 276
    B. Gel 상에서 단백질의 제한적 분해 278

    제14장 단백질­단백질의 화학적 가교 283
    A. 아민기와 아민기 사이의 연결 285
    B. 아민기와 티올기의 연결 288
    C. 카복실기와 아민기의 연결 291
    D. 티올기와 탄수화물(당)과의 연결 294
    E. 티올기와 티올기의 연결 296

    제15장 단백질 전기영동 299
    A. Tricine을 이용한 단백질 전기영동 300
    B. Urea을 이용한 SDS­PAGE 303
    C. Native gel electrophoresis 305
    D. Urea를 사용하지 않는 펩타이드 분석용 SDS­PAGE 307
    E. Cetyltrimethylammonium bromide (CTAB)를 이용한 단백질 전기영동 309

    제16장 Blotting 기법들 313
    A. 블롯의 재사용 314
    B. Blue­Dry Western blotting 316
    C. 전형적인 Western blotting 318

    제17장 세포 파쇄와 단백질 추출 323
    A. 원핵세포로부터 단백질 추출과 inclusion bodies의 용해 324
    B. 대장균 S30 세포 추출물 327
    C. Yeast로부터 단백질 추출 330
    D. 동물세포로부터 단백질 추출 333

    제18장 단백질의 방사성 요오드 표지 335
    A. Chloramine T를 이용한 단백질의 요오드 표지 336
    B. Lactoperoxidase를 이용한 단백질의 요오드 표지 340
    C. IODO­GEN를 이용한 단백질의 요오드 표지 342

    제19장 단백질의 방사성 35S, 3H 표지 347
    A. 대장균 내에서 35S 표지된 단백질 생산 348
    B. 35S 표지된 단백질을 탐침자로 사용 351
    C. 단백질의 in vitro 3H 표지 354

    찾아보기 357

기본정보

상품정보
ISBN 9788997620449
발행(출시)일자 2012년 08월 30일
쪽수 360쪽
크기
188 * 257 mm
총권수 1권

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음반/DVD 바로드림시 유의사항

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도서 소득공제 안내

  • 도서 소득공제란?

    • 2018년 7월 1일 부터 근로소득자가 신용카드 등으로 도서구입 및 공연을 관람하기 위해 사용한 금액이 추가 공제됩니다. (추가 공제한도 100만원까지 인정)
      • 총 급여 7,000만 원 이하 근로소득자 중 신용카드, 직불카드 등 사용액이 총급여의 25%가 넘는 사람에게 적용
      • 현재 ‘신용카드 등 사용금액’의 소득 공제한도는 300만 원이고 신용카드사용액의 공제율은 15%이지만, 도서·공연 사용분은 추가로 100만 원의 소득 공제한도가 인정되고 공제율은 30%로 적용
      • 시행시기 이후 도서·공연 사용액에 대해서는 “2018년 귀속 근로소득 연말 정산”시기(19.1.15~)에 국세청 홈택스 연말정산간소화 서비스 제공
  • 도서 소득공제 대상

    • 도서(내서,외서,해외주문도서), eBook(구매)
    • 도서 소득공제 대상 상품에 수반되는 국내 배송비 (해외 배송비 제외)
      • 제외상품 : 잡지 등 정기 간행물, 음반, DVD, 기프트, eBook(대여,학술논문), 사은품, 선물포장, 책 그리고 꽃
      • 상품정보의 “소득공제” 표기를 참고하시기 바랍니다.
  • 도서 소득공제 가능 결제수단

    • 카드결제 : 신용카드(개인카드에 한함)
    • 현금결제 : 예치금, 교보e캐시(충전에한함), 해피머니상품권, 컬쳐캐쉬, 기프트 카드, 실시간계좌이체, 온라인입금
    • 간편결제 : 교보페이, 네이버페이, 삼성페이, 카카오페이, PAYCO, 토스, CHAI
      • 현금결제는 현금영수증을 개인소득공제용으로 신청 시에만 도서 소득공제 됩니다.
      • 교보e캐시 도서 소득공제 금액은 교보eBook > e캐시 > 충전/사용내역에서 확인 가능합니다.
      • SKpay, 휴대폰 결제, 교보캐시는 도서 소득공제 불가
  • 부분 취소 안내

    • 대상상품+제외상품을 주문하여 신용카드 "2회 결제하기"를 선택 한 경우, 부분취소/반품 시 예치금으로 환원됩니다.

      신용카드 결제 후 예치금으로 환원 된 경우 승인취소 되지 않습니다.

  • 도서 소득공제 불가 안내

    • 법인카드로 결제 한 경우
    • 현금영수증을 사업자증빙용으로 신청 한 경우
    • 분철신청시 발생되는 분철비용

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